LETNIK 29, ŠTEVILKA 2 • JUNIJ 2025. Celotna številka »
Preiskovanje aktivnosti kinaze LRRK2 v monocitih, pridobljenih od bolnikov z azijskimi variantami LRRK2, G2385R in R1628P
Pot sodelovanja in odkrivanja
Prejem nagrade Junior Award na AOPMC 2025 je bil eden najpomembnejših mejnikov na moji doktorski poti. Čeprav je to priznanje povezano z mojim doktorskim raziskovanjem, je predvsem dokaz moči sodelovanja in neverjetne podpore, ki sem jo prejel od mentorjev, soigralcev in kolegov.
To delo ne bi bilo mogoče brez vodstva in spodbude mojih mentorjev – prof. Ai Huey Tan, prof. Shen-Yang Lim, dr. Lei Cheng Lit in prof. Azline Ahmad-Annuar – ter predanosti naše raziskovalne skupine: Jia Wei Hor, Yi Wen Tay, Anis Nadhirah Khairul Anuar, Jia Lun Lim, Jannah Zulkefli in Cindy Lew. Globoko sem hvaležna tudi dr. Esther Sammler, prof. dr. Dario Alessi, Kirsten Black, Neringi Pratuseviciute in Karolini Zeneviciute z Univerze v Dundeeju za njihovo strokovno znanje in podporo med celotnim projektom.
Kako se je vse začelo
Domneva se, da patogene mutacije v genu LRRK2 prispevajo k patogenezi Parkinsonove bolezni (PB) s povečanjem aktivnosti kinaze LRRK2, zaradi česar je zaviranje kinaze LRRK2 obetavna terapevtska strategija. Zanimivo je, da se je fosforilacija Rab10 na treoninu 73 (pRab10Thr73) nedavno pojavila kot robusten biomarker za aktivnost kinaze LRRK2, medtem ko fosforilacija LRRK2 na serinu 935 (pLRRK2Ser935) služi kot farmakodinamični marker za oceno zaviranja kinaze LRRK2. Vendar pa so bili ti potencialni biomarkerji za klinična preskušanja LRRK2 raziskani le v človeških bioloških vzorcih LRRK2 G2019S in R1441G (pogostih v populacijah PB evropskega porekla), ne pa tudi v LRRK2 G2385R in R1628P, ki vsak prizadene 5–10 % azijskih populacij PB.
Z uporabo malezijskih vzorcev, ki smo jih skrbno zbrali in shranili v bioloških bankah v zadnjem desetletju, smo pregledali 2,734 primerov Parkinsonove bolezni in vključili skoraj 250 udeležencev, vključno z nosilci manifestacije (PD-G2385R, PD-R1628P ali oba G2385R+R1628P), pa tudi starostno in spolno primerljive idiopatske bolnike z Parkinsonovo boleznijo (iPD) in zdrave kontrolne osebe (HC), negativne za obe varianti. Vsi udeleženci so bili podvrženi podrobnim kliničnim ocenam, vključno z MDS-UPDRS, CISI-PD in MoCA, odvzeti pa so bili tudi vzorci krvi za takojšnjo izolacijo monocitov.
Sodelovanje med Univerzo Malaya v Maleziji in Univerzo v Dundeeju v Združenem kraljestvu
Monocitne lizate so nato poslali na nadaljnjo analizo na Univerzo v Dundeeju. Tam smo imeli priložnost delati pod vodstvom dr. Esther Sammler in prof. Daria Alessija, kjer smo izvajali imunobloting teste za merjenje ravni pRab10Thr73 in pLRRK2Ser935. Naše trimesečno pripravništvo v Dundeeju ni bilo le znanstveno bogato, temveč tudi osebno pomembno. Ekipa nas je toplo sprejela in z nami radodarno delila svoje znanje, vpoglede in vire. Njihova odprtost in sodelovalni duh sta dala pravi pomen konceptu »odprte znanosti« – načelu, o katerem sem že pogosto slišal, a sem ga s to izkušnjo resnično cenil.
Kaj smo našli
Naši rezultati so pokazali bistveno višje ravni pRab10Thr73 v skupinah PD-G2385R in PD-G2385R+R1628P v primerjavi s HC, ne pa tudi v skupinah iPD ali PD-R1628P. Te ugotovitve so skladne s prejšnjimi podatki in vivo, ki so poročali o ~2-kratnem povečanju pRab10Thr73 v celicah HEK293, ki izražajo varianto G2385R, v primerjavi z divjim tipom LRRK2. Opazili smo znatno interindividualno variabilnost v ravneh pRab10Thr73 v vseh skupinah, kar kaže na to, da lahko dodatni genetski ali okoljski dejavniki modulirajo aktivnost kinaze znotraj te kohorte. Naše ugotovitve skupaj kažejo, da lahko varianta G2385R prispeva k povečani aktivnosti kinaze LRRK2 pri Parkinsonovi bolezni in poudarjajo pomen biokemične stratifikacije, ki presega genotipizacijo bolnikov v prihodnjih raziskavah.
Iskrena hvala
Iskreno se zahvaljujemo fundaciji Michael J. Fox za njihovo velikodušno podporo, ki je omogočila skupno raziskovalno prizadevanje med obema ustanovama. Najpomembneje pa je, da smo neizmerno hvaležni pacientom, njihovim družinam in skrbnikom, ki so se odločili za sodelovanje kljub izzivom, s katerimi se soočajo zaradi parkinsonove bolezni. Njihov prispevek je v središču tega dela in še naprej navdihuje naša prizadevanja na vsakem koraku.
Preberite več o nadaljevanju :